定量检测血清和血浆中抗-PEG IgM的ELISA试剂盒
将聚乙二醇链结合到生物制剂上,这个过程叫做生物制剂的PEG化。蛋白PEG化后可通过减缓蛋白水解和从免疫系统中遮蔽来延长半衰期。然而,重复注射PEG化蛋白可诱导产生抗-PEG抗体,使得清除的速率加快。为了帮助这一领域的研究,西宝生物供应小鼠,大鼠,猴抗-PEG IgM ELISA试剂盒,定量检测小鼠,大鼠和猴中抗-PEG IgM的浓度。
检测原理:
小鼠抗-PEG IgM检测试剂盒基于固相酶联免疫吸附原理。此试剂盒使用固定的单mPEG化BSA(20kDa PEG)作为捕获抗原(包被在微孔上),辣根过氧化物酶抗-小鼠IgM抗体复合物用于检测。稀释血清或血浆样品,同时在微孔板中培养标准品1小时。然后,清洗孔,加入HRP复合物孵育30分钟。抗-PEG IgM分子被夹在固定的PEG和检测抗体复合物之间。冲洗微孔去掉未结合的HRP标记的抗体,加入TMB试剂,室温下孵育20分钟,结果产生蓝色。加入终止液反应终止,颜色变为黄色,检测在450nm处的光密度。抗-PEG IgM的浓度与在450nm处的吸光度值成正比。
此试剂盒主要检测抗PEG聚乙二醇主链的抗体。
试剂盒中包含以下内容:
PEG-BSA包被的96孔板(12条,每条8个孔),在-20℃下储存
抗-小鼠IgM HRP复合物,50ul 。在-20℃下储存
参考标准品(冷冻干燥),2瓶。在-20℃下储存
20×HRP PEG冲洗液,50ml
HRP PEG稀释液,50ml
TMB试剂,11ml
终止液(1N HCL),11ml
需提供以下试剂或耗材:
移液器和枪头
蒸馏水或去离子水
聚丙烯或玻璃管
漩涡混合器
吸水纸或纸巾
微孔板培养仪(混合速度,150转/分钟)
平板垫圈
在450nm处光密度在0-4的平板阅读器
绘图软件
分析过程:
结果分析:
- 分别计算参考标准品和样品在450nm处的平均吸光值
- 用平均吸光值和浓度值做标准曲线,Y轴是吸光值,X轴是浓度
- 使用每个样品的平均吸光值来确定抗-PEG IgM的浓度值
- 浓度值乘以稀释因子来计算出血清或血浆样品中抗-PEGIgM的实际浓度
- 以上步骤使用电脑绘图软件进行绘制
- 如果样品的吸光度值不在标准曲线范围内,样品需要重新稀释和检测
相关ELISA>试剂盒产品如下:
产品名称 | 产品编号 | 产品描述 |
小鼠抗-PEG IgM ELISA试剂盒 | ADM0656A | 用于检测小鼠血清和血浆中抗-PEG IgM |
大鼠抗-PEG IgM ELISA试剂盒 | ADM0658A | 用于检测大鼠血清和血浆中抗-PEG IgM |
猴抗-PEG IgM ELISA试剂盒 | ADM0660A | 用于检测猴血清和血浆中抗-PEG IgM |
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