测序级重组胰蛋白酶MTrypsin
测序级重组胰蛋白酶MTrypsin◆概述
胰蛋白酶（Trypsin; EC 3.4.21.4）是一种丝氨酸蛋白酶，酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由重组毕赤酵母表达并采用层析色谱法纯化获得，氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致。未经修饰的胰蛋白酶自切降解肽段，可能对蛋白质测序及液质联用质量肽图检测造成干扰，自切降解会造成消化样品过程中酶活性降低，且被证明可能产生胰糜蛋白酶活性。本品为重组表达胰蛋白酶，多步纯化无杂酶活性；经还原甲基化修饰，在蛋白组学及质量肽图研究中，对单独酶切或与Lys-C分步/混合酶切时，对蛋白酶水解具有抵抗力，从而保证其活性高稳定性好。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制，金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。
◆特点
● 优良的稳定性：0.1 mg/mL测序级胰蛋白酶MTP，于50 mmol NH4HCO3酶切缓冲中37℃水浴反应过夜（15 h），酶活保留超过90%。
● 良好的特异性：利用测序级胰蛋白酶MTP，1:50(w/w)酶切人胰岛素B链，RP-HPLC于214 nm波长检测酶切产物，酶切16 h产物与2 h产物相比，产物肽峰比例增加而个数为2个且不随时间延长增加。
◆特性
性状 白色或类白色冻干粉
纯度 ≥95%
相对分子量 23 kDa±2.3 kDa
酶比活性 ≥3800 USP/mg
◆来源
由重组毕赤酵母表达并采用层析色谱法纯化获得，氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致。
◆稳定性
酶稳定性对比研究
考察样品均为RTP冻干粉或MTP冻干粉用10 mmol/L HCl或50 mmol/L NH4HCO3溶解的酶溶液（含量为0.1 mg/mL）。
◆使用方法
溶解缓冲：10 mmol/L HCl或CH3COOH，20 mmol/L CaCl2；溶解后分装-15℃以下保存。
酶切缓冲：50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3，1 mmol/L CaCl2，pH 7.6~8.0；
推荐条件：50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3，1 mmol/L CaCl2酶切缓冲中，1:20~1:100比例与待消化蛋白(含量0.5~1.0 mg/mL)混合，30~37℃进行酶切反应；经变性处理的蛋白，尿素或盐酸胍建议稀释至1 mol/L以下。
◆应用实例
MTP与RTP用于酶切质量肽图对比
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获取质谱分子量肽峰个数
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备注
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MTP（黑色)
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13
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1:50酶切15 h
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RTP（蓝色）
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9
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◆保存条件
储存稳定性：冻干粉存于-15℃以下，24个月稳定；HCl或CH3COOH溶解后，分装冻存于-15℃以下。
运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
| MTP1504 | 测序级重组胰蛋白酶MTrypsin | 20 μg |
| MTP1505 | 测序级重组胰蛋白酶MTrypsin | 20 μg×5 |
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| 官网：www.cxbio.com | 微信服务号：iseebio | 微博：seebiobiotech |
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| 商城：mall.seebio.cn | 微信订阅号：seebiotech | 泉养堂：www.canmedo.com |
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