重组蛋白和链酶亲和素(Streptavidin, SA)
蛋白A、蛋白G和蛋白L是微生物来源的天然或重组蛋白质,可以和哺乳动物的免疫球蛋白结合。将这些蛋白偶联于支持物上,利用亲和层析来纯化抗体,也可用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。不同的抗体结合蛋白与不同的免疫球蛋白的结合能力并不一样,它们受到后者的来源及亚类的影响,因此对于不同的抗体需要选择不同的抗体结合蛋白。
蛋白A是葡萄球菌细胞壁的组成成分,42kD,能特异性的结合免疫分子的Fc区,特别是IgG. 有4个亲和结合位点,耐热和耐变性剂(4M尿素,6M盐酸胍);用途:可以广泛用于分离不同种属来源的哺乳动物IgG分子。
蛋白G是G型链球菌细胞壁的组成成分,主要与大多数哺乳动物的免疫球蛋白的Fc区结合,结合能力大于蛋白A;用途:主要用来纯化不能与蛋白A很好结合的单抗和多抗。不能结合人IgM,D,A。
蛋白L源于细菌Peptostreptococcus,是一种能和广泛的免疫球蛋白相结合的蛋白质,该蛋白只与抗体的k链结合而不会影响抗体的抗原结合位点,这一特性使其与蛋白A或蛋白G相比,能更广泛地结合各种来源及亚类的抗体。用途:它不结合牛、山羊或绵羊来源的免疫球蛋白,可以用于从添加BSA或FCS的培养液中纯化单克隆抗体。
链霉亲和素(Streptavidin,SA),是链霉菌在培养过程中分泌的一种蛋白质产物。SA的分子量为60Kda,内4条序列相同的肽链组成。如同亲合素一样,一个SA分子也能结合4个生物素分子,二者亲和常数亦为1015/mol。SA的每条肽链含159个氨基酸残基,其中赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的含量比亲合素少,因此SA是一种稍偏酸性的蛋白质,其pI为5.5,并且不带糖基。
1.蛋白类产品和链酶亲和素
货号
|
英文名称
|
中文名称
|
液体 |
冻干粉 |
重组产品来源
|
188230
|
Recombinant Protein A
|
重组蛋白A
|
1mg/10mg/100mg
|
E. coli
|
|
应用:结合兔,猪,狗和猫的 IgG,结合抗体Fc区, 液体浓度:5mg/ml
|
|||||
188241
|
Recombinant Protein G
|
重组蛋白G
|
1mg/10mg/100mg
|
E. coli
|
|
应用:结合小鼠,人的IgG 亚型(IgG1, IgG2, etc.), 结合抗体Fc区,液体浓度6mg/ml
|
|||||
188250
|
Recombinant Protein A/G
|
重组蛋白A/G
|
5mg
|
|
E. coli
|
应用:结合来自于兔,小鼠,人或其他哺乳动物IgG, 结合抗体Fc区
|
|||||
188261
|
Recombinant Protein L
|
重组蛋白L
|
1mg/10mg
|
E. coli
|
|
应用:结合IgG, IgM, IgA, IgE and IgD, 结合抗体kappa轻链, 液体浓度:5mg/ml
|
|||||
188272
|
Strepavidin
|
链酶亲和素
|
1mg/10mg
|
|
|
应用:与亲和素连接,用于亲和层析, 液体浓度7-12mg/ml
|
免疫球结合蛋白的一般特性
重组蛋白A |
重组蛋白G |
重组蛋白 A/G |
重组蛋白 L |
|
天然来源 |
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) |
链球菌(Streptococcus) |
N/A |
大消化链球菌(Peptostreptococcus magnus) |
重组产品来源 |
E. coli |
E. coli |
E. coli |
E. coli |
分子量 |
44,600 |
21,600 |
50,460 |
35,800 |
SDS-PAGE |
45 kDa |
32 kDa |
40-45 kDa |
36 kDa |
免疫球蛋白Ig结合位点数 |
4 |
2 |
6 |
4 |
白蛋白结合位点 |
No |
No |
No |
No |
适合结合pH值 |
8.2 |
5 |
5~8.2 |
7.5 |
Ig目标结合区 |
Fc |
Fc |
Fc |
kappa轻链 |
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