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ScreenFect A+ DNA & siRNA 转染试剂

来源:作者:人气:-发表时间:2025-07-14 10:31:00【
ScreenFect A+
DNA & siRNA 转染试剂
通过点击化学开发的新型脂质体!!
ScreenFect ™A plus(也称作ScreenFect ™A+)是通过点击化学(Click Chemistry)筛选※1出的新型阳离子脂质体组成的转染试剂,适用于各种真核生物来源的细胞,也可直接添加至含有抗生素或者血清的培养基中。
使用 ScreenFect ™A plus转染试剂可将DNA和siRNA导入通用实验细胞系(HeLa、HepG2、MDCK等)、干细胞(小鼠ES细胞等)、血细胞(巨噬细胞、THP-1、RAW264.7等)、小胶质细胞、原代细胞(原代培养)和昆虫细胞中。其细胞毒性低,因此转染后无需更换培养基。另外,试剂成分中不含有任何有毒有害物质。
※1 Biomaterials. 2012 Nov; 33(32):8160-6. 2012
特点
● DNA和ScreenFect ™A plus试剂混合比例可选范围更广
● 使用一步法缩短分析时间至1天
● 可高效转染难以导入的细胞
● 成本低
ScreenFect ™A plus 转染性能
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※ MCF-7:人乳腺癌来源细胞(上皮细胞样形态)(贴壁系)
※ 导入方法:A公司新产品 → 2步法ScreenFect ™A plus → 1步法
改善难以导入的细胞的转染效率!
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※ MDCK:狗肾小管上皮细胞来源(贴壁系)
※ 导入方法:A公司新产品 → 2步法ScreenFect ™A plus → 1步法
改善难以导入的细胞的转染效率!
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※ K562:人慢性髓性细胞白血病细胞来源(悬浮系)
※ 导入方法:A公司新产品 → 2步法ScreenFect ™A plus → 1步法
改善难以导入的细胞的转染效率!
◆应用数据
1. 向LNCaP细胞(贴壁系)中导入YFP融合基因的实验
进行向LNCaP细胞(贴壁系)中导入YFP融合基因的实验,在荧光显微镜下比较导入基因的表达效率。
使用ScreenFect ™A plus和增强剂SFA P-reagent,可以观察到与其他公司产品相同或更高的表达效率。
※ 数据刊登于BioWindow No.144 (2016年6月号)
LNCap (人前列腺癌) 中的性能比较
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〔接种细胞数〕3×10cells/well
〔质粒DNA量〕1 µg/assay
〔转染试剂混合比例〕
 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 3
〔孔板〕24孔板
〔接种细胞数〕1.5×10cells/well
〔质粒DNA量〕1 µg/assay
〔转染试剂混合比例〕
 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 3
〔孔板〕24孔板
2. 向HeLa细胞(贴壁系)中导入EGFP_mRNA的实验
进行向HeLa细胞(贴壁系)中导入EGFP_mRNA的实验,在荧光显微镜下比较EGFP的表达效率。
使用ScreenFect ™A plus和增强剂SFA P试剂(产品编号:191-18331、197-18333),可以观察到与其他公司产品相同或更高的表达效率。
※ 数据刊登于BioWindow No.144 (2016年6月号)
HeLa细胞中的mRNA转染性能比较
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〔接种细胞数〕0.7 x 10cells/well
〔mRNA量〕0.1 µg/assay
〔转染试剂混合比例〕mRNA量 (µg) : ScreenFect ™ A plus 试剂(µL) = 1 : 4
〔检测时间〕转染后48 h
〔曝光时间〕2 s
3. 向hiPSC(201B7株)中导入GFP融合基因的实验
进行将hiPSC(201B7株) 通过反向转染(1-STEP)导入GFP融合基因的实验,在荧光显微镜以及流式细胞仪下比较导入基因的表达效率。
使用反向转染法转染hiPS细胞的效果优异,在StemSure® hPSC培养基Δ和mTeSR™ 1两个培养基中,ScreenFect ™A plus表现出与其他公司产品相同或更高的导入效率。
※ 数据刊登于BioWindow No.144 (2016年6月号)
hiPSC(201B7株)中的性能比较
1-step   使用StemSure® hPSC培养基Δ
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ScreenFect™A plus的转染条件
〔细胞数〕5×10cells/well
〔质粒DNA量〕4 µg/assay
〔转染试剂混合比例〕
 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 0.5
〔孔板〕12孔板
〔备注〕SFA plus reagent以及pDNA使用了Opti-MEM® 进行稀释。
其他公司产品的转染条件
〔细胞数〕5×10cells/well
〔质粒DNA量〕2 µg/assay
〔转染试剂混合比例〕
 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 2
〔孔板〕12孔板
1-step   使用mTeSR™1培养基
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ScreenFect™A plus和其他公司产品的转染条件
〔细胞数〕5×10cells/well
〔质粒DNA量〕1 µg/assay
〔转染试剂混合比例〕
 pDNA量 (µg) : ScreenFect ™A plus reagent (µL) = 1 : 2
〔孔板〕12孔板
〔备注〕SFA plus reagent以及pDNA使用了Opti-MEM® 进行稀释。
4. 向HeLa细胞(贴壁系)中导入PIK3CB siRNA的实验
使用反向转染(1-STEP)法以及正向转染(2-STEP)法进行向HeLa细胞中导入PIK3CB siRNA的实验,通过实时定量PCR测量PIK3CB mRNA的表达水平。
在定量结果的基础上与其他公司产品比较敲降效率,结果显示ScreenFect ™A plus表现出与其他公司产品相同或更高的敲降效率。
※ 数据刊登于BioWindow No.149 (2017年3月号)
HeLa细胞中的性能比较
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〔接种细胞数〕1×10cells/well
〔siRNA〕5 pmol/assay
〔转染试剂混合比例〕ScreenFect ™A plus reagent = 0.5~1.5 µL
  其他公司产品 = 1.5 μL
〔孔板〕24孔板
〔检测时间〕48 h后进行确认
〔接种细胞数〕0.5×10cells/well
〔siRNA〕5 pmol/assay
〔转染试剂混合比例〕ScreenFect ™A plus reagent = 0.5~1.5 µL
  其他公司产品 = 1.5 μL
〔孔板〕24孔板
〔检测时间〕48 h后进行确认
◆使用方法、拥有使用实绩的细胞
1-Step与2-Step 操作比较
产品
ScreenFect™A plus
A公司新产品(+reagent)
A公司的新产品
各条件
1-Step
2-Step
实验方案天数
2 Days
3 Days
DNA量
是否需要调整细胞数
可随时调整
取决于预培养条件
是否需要胰蛋白酶处理
转染时
预培养时
基于HTS细胞检测的可操作性
+++++
+
是否需要更换培养基
取决于细胞
ScreenFect ™A plus一步法概要
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1步法 → 从转染到本分析的时间可缩短24 h!
ScreenFect ™A plus 转染条件
DNA转染
DNA 转染 (/well)
孔板类型
表面积
培养基体积
SF-DNA
复合物的总体积
DNA
/稀释buffer
转染试剂
/稀释buffer
96 wells
0.3 cm2
100 µL
10 µL
50 ng/5 μL
0.15 or 0.2 μL/5 μL
24 wells
2 cm2
500 µL
50 µL
250 ng/25 μL
0.75 or 1.0 μL/25 μL
12 wells
4 cm2
1,000 µL
100 µL
500 ng/50 μL
1.5 or 2.0 μL/50 μL
6 wells
10 cm2
2,000 µL
250 µL
1,250 ng/125 μL
3.75 or 5.0 μL/125 μL
siRNA转染
注:进行大规模转染时,请在转染前准备多个微管,之后再进行转染。
例:10 cm培养皿转染相当于 → 5~6个样品(6孔板)
▼ ScreenFect ™A plus 推荐实验方案
产品随附的说明书中提供了简易的实验方案,请确认“相关资料”中的文件。
ScreenFect™A plus推荐使用1步转染法。在试剂方面,为保证充分的转染效率,推荐质粒DNA与转染试剂的混合比例为1 : 3~1 : 4。另外,如希望进一步抑制转染时的细胞毒性,请使用60~80%汇合度的细胞。
siRNA转染
siRNA 转染 (/well)
孔板类型
表面积
培养基体积
SF-siRNA
复合物的总体积
siRNA
/稀释buffer
转染试剂
/稀释buffer
96 wells
0.3 cm2
100 µL
10 µL
1 pmol/5 µL
0.1~0.3 µL/5 µL
24 wells
2 cm2
500 µL
50 µL
5 pmol/25 µL
0.5~1.5 µL/25 µL
12 wells
4 cm2
1,000 µL
100 µL
10 pmol/50 µL
1.0~3 µL/50 µL
6 wells
10 cm2
2,000 µL
250 µL
25 pmol/125 µL
2.5~7.5 µL/125 µL
注:虽然ScreenFect ™A plus也可以用于siRNA转染,但更推荐使用ScreenFect ™ siRNA 进行siRNA转染。
拥有ScreenFect ™A & A plus 应用实例的细胞
更多详细资料请联系富士胶片和光。
No.
细胞名称
No.
细胞名称
No.
细胞名称
No.
细胞名称
1
143BTK
22
GP2-293
43
LLC-MK2
64
OLHNI-2
2
786-O
23
H9C2
44
LO2
65
Mouse overy cell
3
A2058
24
HCT116
45
LoVo
66
PC12
4
A375
25
HEK293
46
MC3T3
67
Plat-E
5
A549
26
HEK293 TN
47
MC3T3-E1
68
PLC8024
6
B16
27
HEK293A
48
MCF-10
69
Primary Fibroblast
7
B16F10
28
HEK293F
49
MCF-10A
70
RAW264.7
8
Ba/F3-CH1
29
HEK293FT
50
MCF-7
71
SH-SY5Y
9
BEAS-2B
30
HEK293T
51
MDCK
72
SK-Hep1
10
BEL-7402
31
HeLa
52
MEF
73
SKOV3
11
BT549
32
HeLa S3
53
mES
74
T98G
12
C2C12
33
HEp-2
54
mHSC
75
TE-13
13
Cell line from killifish
来自鳉鱼的细胞系
34
HepG2
55
Microglia 小胶质细胞
76
THP-1
14
CHO-K1
35
hiPSC
56
MLEC
77
U-251 MG
15
COS-7
36
HK2
57
MS-1
78
U2OS
16
DB lymphoma  
DB淋巴瘤
37
HKC
58
Myeloid dendritic cell (MDC) 
骨髓树突状细胞
79
U937
17
DC 2.4
38
HL7704
59
NB1RGB
80
Vero
18
Du145
39
HuH-7
60
NCI-H1703
81
Drosophira ovary somatic cell
19
EL4
40
HUVEC
61
NE3
82
HT1080
20
Endothelium cell 
内皮细胞
41
Ins-1
62
NIH 3T3
83
RH7777
21
EPC(carp)
42
L428
63
NK92
84
HaCaT
富士胶片和光将实时更新ScreenFect™数据库中的使用实例,如对上述内容有疑问,欢迎随时联系进行咨询。
产品列表
产品编号 产品名称 产品规格
293-73201 ScreenFect™ A 0.2 mL
299-73203 ScreenFect™ A 1 mL
297-73204 ScreenFect™ A 1 mL×5
293-75901 ScreenFect™ mRNA 0.2 mL
299-75903 ScreenFect™ mRNA 1 mL
299-75001 ScreenFect™ siRNA 0.2 mL
295-75003 ScreenFect™ siRNA 1 mL
290-80203 ScreenFect™ UP-293 1 L用
294-80201 ScreenFect™ UP-293 100 mL用
191-18331 SFA P-reagent 100 μL
197-18333 SFA P-reagent 500 μL
194-18181 ScreenFect™ Dilution Buffer 50 mL

 

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