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TEV蛋白酶,蛋白标签切除一步到位,生物医药的“黄金剪刀”

来源:作者:人气:-发表时间:2025-08-20 13:42:00【
在重组蛋白的表达纯化中,通常会通过添加融合标签(如MBP、His、GST)的方式来提高目标蛋白的可溶性并促进其正确折叠等。
根据实际需求,某些融合标签需要被去除,使用特定的蛋白酶精准、高效地去标签,获得结构、功能和所需产物高度一致目标蛋白。在生物医药领域,在终产品中排除此类外源标签对于产品和工艺都至关重要。
【TEV蛋白酶简介】
TEV蛋白酶来源于烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus, TEV),具备很高的位点特异性,相比凝血酶、Factor Xa和肠激酶等蛋白酶,TEV酶对底物序列的识别更为精准,常用于从融合蛋白中去除标签,如 GST、MBP、His 等。
TEV酶可特异性识别七肽序列:
Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-↓-Gly/Ser(ENLYFQ↓G/S)
TEV酶特异性识别序列和切割位点示意图
【TEV蛋白酶应用】
I.重组蛋白疫苗的生产
TEV蛋白酶在病毒表面蛋白(如新冠病毒刺突蛋白)的生产中,TEV酶去除融合标签(如His或GST),显著提高抗原的免疫原性和纯度,优化重组亚单位疫苗的效价‌。
在VLP型疫苗的生产中,TEV蛋白酶除了上述功能外,还通过切割病毒外壳前体蛋白,促进病毒蛋白亚基自组装。
II. 蛋白和ADC药物的生产
TEV蛋白酶经用于切割药物载体中的融合蛋白,释放具有治疗活性的成分。例如在肿瘤靶向药物中,通过精确切除标签蛋白(如GST、His等),确保活性药物成分(如单克隆抗体或细胞因子)的完整性。。
在抗体偶联药物开发中,TEV蛋白酶用于切除连接肽,精准控制药物释放位点,是生产工艺中的关键步骤,对提升抗体偶联药物的疗效和安全性‌至关重要。
III. 疾病模型蛋白科研
TEV蛋白酶可以用于疾病模型研究,例如在神经退行性疾病等科研中,通过切割荧光蛋白与定位肽的融合体,可以追踪致病蛋白的异常聚集过程‌。
IV. 高纯度酶制剂
在工业酶(如淀粉酶、脂肪酶)生产中,TEV蛋白酶去除融合标签,提升酶纯度和稳定性,降低纯化成本
【产品特点和优势】
1. 专一性强,几乎无非特异性切割;
2. 反应温和,本品在pH 7.0,30℃时可达到最佳活性;在pH 6.0-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性;
3. 本品经多步色谱纯化,纯度≥95%;
4. 本品N端含有6×His标签,方便通过镍离子树脂进行亲和吸附;
【活性测定试剂盒】
西宝生物同时提供TEV蛋白酶的活性测定试剂盒。
试剂盒基于TEV蛋白酶的特异性底物肽被切割后形成稳定、高荧光、低背景的荧光产物,通过检测386nm激发光下,480nm发射光的荧光强度,再利用标准曲线准确定量出TEV蛋白酶的活性。本品可用于检测样本中TEV蛋白酶活性或TEV酶残留量。
本试剂盒简单、快速,适合纯品及组织裂解液上清中TEV酶活性的定量检测,酶活性的线性检测范围为0.1~ 1.0 U/μl。
【酶活定义】
在30℃条件下反应1小时,能够切割>85%的3µg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
【产品详情】
浓度
≥2mg/ml
比活力
≥1KU/ml
纯度
≥95%(by SDS-PAGE)
形态
液体
SDS-PAGE实验结果
【包装规格】
产品货号
包装规格
EBY3644B-5mg
5mg/支
EBY3644B-10mg
10mg/支
【相关产品列表】
产品
货号
Seebio® 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEV酶)
EBY3644
Seebio® TEV 蛋白酶(TEV Protease)活性测定试剂盒(荧光法)
EKM0101B
SUMO 蛋白酶(冻干粉)
EAE0087A
重组肠激酶
ECE1123A
大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)
DAA1065A
重组HRV 3C蛋白酶
FCE1220A

 

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此文关键字:TEV蛋白酶 蛋白标签切除