TRITC标记赖氨酸葡聚糖
TRITC标记赖氨酸葡聚糖
TRITC标记赖氨酸葡聚糖是一种葡聚糖衍生物，携带游离伯胺和游离羧酸盐以及荧光染料四甲基罗丹明（TRITC）。赖氨酸是一种天然氨基酸，在生物化学和生命科学中广泛用于结合和固定。TRITC标记赖氨酸葡聚糖也称为FLUORO-RUBY®或FLUORORUBY®。纯化后，检查所有批次的分子量、取代度、干燥失重和游离TRITC。TRITC-标记赖氨酸葡聚糖为粉色粉末。TdB提供分子量从4 kDa到500 kDa的TRITC标记赖氨酸葡聚糖。
高质量的TRITC标记赖氨酸葡聚糖具备:
- 优异的分子量分布 (低多分散性)
- 明亮的荧光
- 细胞和组织的固定性
- 容易与染料或生物分子结合
- 可完全溶于水，在溶液中或在保质期内具有良好的稳定性
结构与性质
TRITC赖氨酸葡聚糖是从肠系膜明串珠菌中提取的具有良好特性的葡聚糖合成的。葡聚糖部分首先用赖氨酸标记，然后在温和条件下暴露于TRITC中形成TRITC标记赖氨酸葡聚糖。纯化后，对产物的分子量、外观、溶解度、取代度、pH、游离赖氨酸和游离TRITC进行检测控制。赖氨酸的取代度在0.005-0.03（mol赖氨酸/mol葡萄糖）之间，TRITC的取代度为0.001-0.01（mol TRITC/mol葡萄糖）。产品分子量由相应近似分子量的葡聚糖标定。
举例，TRITC标记赖氨酸葡聚糖4的分子量约为4000 Da。实际分子量由GPC确定。COA上会注明该指标。葡聚糖来自于明串珠菌B-512F，本质上是一个线性的α-（1-6）-连接的葡萄糖链，且沿链分布的α-（1-3）支链的百分比很低（2-5%）。葡聚糖片段的分子量在4000到500000之间，并通过GPC、旋光度、吸光度和其他控制参数进行仔细控制。
图1 TRITC标记赖氨酸葡聚糖结构示意图。赖氨酸是否主要通过 ε- 或α-氨基基团与葡聚糖结合尚未见诸研究。
物理性质
TRITC标记赖氨酸葡聚糖是粉色至紫色粉末，可完全溶于水和电解质。TRITC标记赖氨酸葡聚糖不溶于大多数有机溶剂，例如乙醇，甲醇，丙酮，氯仿，乙酸乙酯等。 赖氨酸的取代度介于 0.005-0.03之间 (mol 赖氨酸/mol 葡萄糖)，TRITC的取代度则介于0.001-0.01之间 (mol TRITC/mol 葡萄糖)。TRITC 的最大激发波长为550 nm，最大发射波长为574 nm。 (图2)。
图2. TRITC标记赖氨酸葡聚糖在pH为9.0的0.025M的硼酸盐缓冲液中（12mg溶于50毫升缓冲液）的荧光吸收图谱，
激发波长552nm，发射波长576nm。
储存和稳定性
有关TRITC标记赖氨酸葡聚糖稳定性的前瞻性研究尚未进行。但是根据葡聚糖和赖氨酸与葡聚糖链的脲键的结构特性判断，该产品具有较高的稳定性。TRITC与赖氨酸之间的硫脲键也是稳定的。
建议将产品储存在气密容器中。TRITC赖氨酸葡聚糖可在室温下储存。室温下储存在干燥密闭的容器中，TRITC标记赖氨酸葡聚糖可稳定保存6年。
应用
带氨基的葡聚糖，作为生命系统结合和固定的多功能工具，对科学界极具价值1,2 。用于接合时，赖氨酸的游离氨基能共价结合到诸如NHS酯或异硫氰酸酯之类的活化体上，或使用诸如DCC、HOBt或HATU等常见肽偶联剂与羧酸偶联。进行细胞和组织固定是为了将组分保存在“类生命状态”，并使细胞具有可渗透性，允许抗体进入细胞结构，例如用于显微镜研究或免疫染色。赖氨酸葡聚糖上的氨基与固定剂（此处是甲醛或戊二醛）反应，与蛋白质和脂类等生物分子形成共价交联，固定整个系统和葡聚糖。这在分子成像中定性或定量评估生物事件时尤为重要。如果没有固定，活系统中的这些结构会迅速地解体和扩散。四甲基罗丹明/TRITC是一种荧光染料，其最大激发波长为550nm，最大发射波长为574nm。
产品列表
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产品编号
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品名
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分子量(kDa)
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包装
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TRITC-lysine-dextran 4
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4
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10 mg
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50 mg
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TRITC-lysine-dextran 10
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10
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10 mg
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50 mg
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TRITC-lysine-dextran 70
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70
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10 mg
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50 mg
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TRITC-lysine-dextran 500
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500
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10 mg
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50 mg
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参考文献
1. (a) Henley JR, Krueger EW, Oswald BJ, McNiven MA, J Cell Biol (1998) 141:85-99; (b) Fritzsch B, Christensen MA, Nichols DH; J Neurobiol. 1993 Nov;24(11):1481-99; (c) Fritzsch B., J Neurosci Methods (1993) 50:95-103.
2. Schmued, L., Kyriakidis, K., Heimer, L., Brain Res., 526, (1990) 127-134.
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