组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂复合物（tPAI.C） - 磁微粒化学发光法（AE/AP）解决方案

来源：作者：人气：-发表时间：2025-07-11 12:48:00【大中小】

1.项目背景

组织型纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活抑制物-1复合物 (tissue plasminogen activator-plasminogen activator inhibitor-1 complex，tPAI.C):tPAI.C是血管内皮细胞损伤时，释放t-PA与PAI-1共同入血形成的复合物。tPAI.C的正常值根据性别有不同，男性血浆正常值<17.0 ng/mL，女性<10.5 ng/mL。理论上tPAI.C是内皮损伤及纤溶系统激活的产物，临床研究中发现tPAI.C对休克严重状态特别是脓毒症休克的诊断价值很高。

血液中t-PA?PAI-1抗原量反映了释放于血液中的t-PA的量，因此针对t-PA增加的病态，就结果而言其t-PA?PAI-1复合物也会增加释放于血液中的t-PA会将纤溶酶原激活为纤溶酶，因此可将t-PA?PAI-1复合物作为纤溶系统的分子标志物，PIC的增加代表着纤溶系统最终阶段的纤溶酶的生成，相对于此，t-PA?PAI-1复合物的增加并不一定意味着纤溶亢进。

血管内皮细胞受损后，t-PA会与PAI-1一同释放于血液中，因此可认为t-PA?PAI-1复合物的上升也反映了血管受损。动静脉血栓的存在、炎性细胞因子和内毒素带来的刺激，会引发大范围血管病变的代谢性疾病等现象均易引起t-PA?PAI-1复合物上升。有报告指出，在并发有多器官功能衰竭的弥散性血管内凝血中，病程中血中t-PA?PAI-1复合物呈高值的病例绝大多数预后不佳。下图是tPAI.C的作用机制。

2. 性能表现

针对tPAI.C的检测，西宝生物推出5种单克隆抗体及1种抗原。具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）

2.1化学发光（AE）平台

组合1：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204A）包被羧基磁珠+Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1205A）标记吖啶酯；

线性范围：1 ng/mL-100 ng/mL；最低检出限：1 ng/mL。

组合2：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204A）包被羧基磁珠+Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204B）标记吖啶酯；

线性范围：1 ng/mL-100 ng/mL；最低检出限：1 ng/mL。

2.2化学发光（AP）平台

组合3：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204C）包被羧基磁珠+Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1205C）标记碱性磷酸酶；

线性范围：1 ng/mL-100 ng/mL；最低检出限：1 ng/mL。

2.3稳定性评估

2.3.1 tPAI.C抗原稳定性

采用磁珠标记物稀释液（货号：DCD0532A）将tPAI.C抗原（货号：EDD0796B）稀释成5个梯度（液体型），进行37℃热稳定性实验。如表1所示，tPAI.C抗原稀释梯度（液体型）37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明tPAI.C抗原稀释梯度（液体型）热稳定性良好。

表1 tPAI.C抗原稀释梯度（液体型）热稳定性7天数据

序号	tPAI.C 抗原稀释浓度浓度ng/mL	tPAI.C 抗原稀释梯度（液体型）2℃-8℃储存7天发光值均值	tPAI.C 抗原稀释梯度（液体型）37℃热加速7天发光值均值	tPAI.C 抗原稀释梯度（液体型）37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值均值差异
S0	0	17053	17591	3.2%
S1	1	157554	149224	-5.3%
S2	5	640325	625343	-2.3%
S3	12.5	1536860	1473164	-4.1%
S4	50	6238834	5723227	-8.3%
S5	100	11871700	11114161	-6.4%
平均变化（不含S0）				-5.3%

2.3.2 AP体系试剂稳定性

采用磁珠标记物稀释液（货号：DCD0532A）将Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204C）包被羧基磁珠浓缩液稀释成工作液，进行37℃热稳定性实验；采用碱性磷酸酶（ALP）标记物稀释液（货号：DCD0533A）将Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1205C）标记碱性磷酸酶浓缩液稀释成工作液，进行37℃热稳定性实验。如表2所示：

a.tPAI.C磁珠工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化为-1.6%，在±10%以内（不含S0），表明tPAI.C磁珠工作液热稳定性良好；

b.tPAI.C碱性磷酸酶工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化为-9.1%，在±10%左右（不含S0），表明tPAI.C碱性磷酸酶工作液热稳定性较好。

c.tPAI.C全试剂工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化为-13.6%，在±15%左右（不含S0），表明tPAI.C试剂热稳定性较好。

表2 tPAI.C试剂热稳定性7天数据

序号	tPAI.C 抗原稀释梯度浓度（ng/mL）	磁珠工作液37℃热加速7天偏差	碱磷酶工作液37℃热加速7天偏差	全试剂工作液37℃热加速7天偏差
S0	0	-8.2%	-5.9%	-9.4%
S1	1	-4.4%	-9.7%	-13.1%
S2	5	-2.5%	-10.9%	-13.4%
S3	12.5	-0.5%	-8.5%	-14.1%
S4	50	-0.4%	-9.1%	-14.2%
S5	100	-0.2%	-7.4%	-13.3%
平均变化（不含S0）		-1.6%	-9.1%	-13.6%

3.临床相关性

3.1化学发光（AE）平台

西宝tPAI.C抗体配对组合1（＜20 ng/mL）的发光值与希森美康 tPAI.C发光试剂临床相关性R²>0.92。

西宝tPAI.C抗体配对组合1（＜100 ng/mL）的发光值与希森美康 tPAI.C发光试剂临床相关性R²在0.95左右。

西宝tPAI.C抗体配对组合2（＜20 ng/mL）的发光值与希森美康 tPAI.C发光试剂临床相关性R²>0.92。

西宝tPAI.C抗体配对组合2（＜100 ng/mL）的发光值与希森美康 tPAI.C发光试剂临床相关性R²在0.95左右。

3.2化学发光（AP）平台

西宝tPAI.C抗体配对组合3的发光值与希森美康 tPAI.C发光试剂临床相关性R²在0.95左右。

4. 测试方案

4.1化学发光（AE）平台抗体配对组合1

待测抗原：tPAI.C抗原（货号：EDD0796B）

样本/校准品:加样量10ul；

试剂1：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204A）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1205A）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

反应条件：

第一步：10ul样本+50ul试剂1+50ul试剂2混合，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。

测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S。

4.2化学发光（AE）平台抗体配对组合2

样本/校准品:加样量50ul；

试剂1：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204A）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204B）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

反应条件：

第一步：50ul样本 + 50ul试剂1 + 50ul试剂2混合，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。

测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S。

4.3化学发光（AP）平台抗体配对组合3

待测抗原：tPAI.C抗原（货号：EDD0796B）

样本/校准品:加样量5ul；

试剂1：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1204C）包被-磁珠稀释物，用量100ul/测试；

试剂2：Anti tPAI.C antibody（货号：EKY1205C）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量100ul/测试；

反应条件：

第一步：5ul样品 + 100ul试剂1，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入100ul试剂2，37℃孵育10min，清洗；

第三步：加入底物，进行测试。

测试使用发光仪器:迎凯Shine i2900。

5.产品信息

产品名称	货号	推荐配对
纤溶酶原激活物抑制剂-I(PAI)抗体	EKY1205A	组织型纤溶酶原激活物（t-PA）抗体（货号：EKY1204A）包被羧基磁珠+纤溶酶原激活物抑制剂-I(PAI)抗体（货号：EKY1205A）标记吖啶酯（发光两试剂配对组合1）组织型纤溶酶原激活物（t-PA）抗体（货号：EKY1204A）包被羧基磁珠+纤溶酶原激活物抑制剂-I(PAI)抗体（货号：EKY1204B）标记吖啶酯（发光两试剂配对组合2）
组织型纤溶酶原激活物（t-PA）抗体	EKY1204A
纤溶酶原激活物抑制剂-I(PAI)抗体	EKY1204B
抗纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物（tPAI.C）抗体	EKY1204C	纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物（tPAI.C）抗体（货号：EKY1204C）包被羧基磁珠+纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物（tPAI.C）抗体（货号：EKY1204D）标记碱性磷酸酶（发光两试剂配对组合3）
抗纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物（tPAI.C）抗体	EKY1205C
组织纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物（tPAI.C）抗原	EDD0796B
组织型纤溶酶原激活物（t-PA）抗体（货号：EKY1204A）-羧基磁珠浓缩液	DKY1328A
纤溶酶原激活物抑制剂-I(PAI)抗体（货号：EKY1205A）-吖啶酯浓缩液	DKY1328B
纤溶酶原激活物抑制剂-I(PAI)抗体（货号：EKY1204B）-吖啶酯浓缩液	DKY1328C
组织型纤溶酶原激活物抗体（货号：）-羧基磁珠浓缩液	DKY1328D
组织型纤溶酶原激活物抗体（货号：）-碱性磷酸酶浓缩液	DKY1328E
羧基磁性微球，1.2μm	DEG0800D
AMPPD 发光底物液（即用型）	DCD0517B
重组碱性磷酸酶（高活性）	DCE0108L
磁珠标记物稀释液（化学发光）	DCD0532A
碱性磷酸酶（ALP）标记物稀释液（化学发光）	DCD0533A