尼龙毛柱(Nylon Wool Fiber Syringe)-T细胞分离用

来源：作者：人气：-发表时间：2017-02-10 10:43:00【大中小】

  西宝生物提供商品化的尼龙毛柱(Nylon Wool Fiber Syringe)，供T细胞分离用，无需自行灭菌，使用方便，详情致电400-021-8158！
尼龙毛柱法分离T细胞原理
  尼龙毛纤维可用于从周围血中分离白细胞和从B细胞中分离T细胞。利用的是尼龙毛对B细胞的吸附力，粒细胞和B细胞会粘在纤维上，而T细胞和其他细胞则不会。

  产品描述
采用Becton Dickinson的一次性的10cc塑料注射器，预装0.5g细丝状的尼龙毛（大约装至5CC线上）；
即用型，已灭菌，10支装一盒；
尼龙毛柱的柱塞装置用于洗脱粘连的B细胞，单路旋塞用于控制T细胞洗涤、孵育、洗脱的步骤。

细胞分离的操作过程
1、从包装中取出注射器和柱塞，取出旋塞，并安装在注射器的鲁尔接头。
2、在37°C下用选定培养基洗涤柱子，洗涤时轻轻按动柱塞以确保羊毛浸润且没有气泡。推荐的培养基包括含5%热灭活胎牛血清（FCS）的Dulbecco PBS，含10%小牛血清的Hank平衡盐溶液（HBSS），含10%胎牛血清（FCS）的RPMI-1640，含10%胎牛血清（FCS）的EBSS，含10%胎牛血清（FCS）的McCoy’s 5A培养基。
3、关闭旋塞，预装柱在37°C培养1小时。
4、打开旋塞，从尼龙毛柱的顶部排干培养基后关闭。
5、每根柱子里加2×108活细胞到2ml培养基中。打开旋塞并逐渐排干培养基，直至细胞完全进入预装的尼龙毛中。关闭旋塞。
6、用2ml培养基洗涤柱子的顶部，并允许洗液进入预装尼龙毛中。关闭旋塞。
7、添加2~5ml培养基，以确保尼龙毛顶部被培养基覆盖。
8、在37°C培养1小时.
9、洗涤两次，收集不粘的T细胞。不要推柱塞！
10、收集粘性的B细胞时，可以添加培养基直至充满柱子，轻敲柱子使细胞脱离尼龙毛。推柱塞，并重复两次。
11、在1200rpm离心10分钟收集细胞，上清液弃去。
12、在大约10ml相同的培养基重新悬浮细胞颗粒。