Jackson 羊驼家族-纳米抗体VHH上市

来源：作者：人气：-发表时间：2019-09-24 13:48:00【大中小】

什么是纳米抗体？

1993年，比利时科学家在自然杂志中首次报道羊驼外周血液中存在一种天然缺失轻链的抗体，即重链抗体（heavy-chain antibody，hcAb）。单域重链抗体（single domain antibody，sdAb）是指仅由重链抗体可变区（Variable region）组成的基因工程抗体，又称为VHH抗体（variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody，VHH antibody）或纳米抗体（Nanobody，Nb）。

该种抗体只包含一个重链可变区（VHH）和两个常规的CH2与CH3区，却具有非常好的稳定性，不像人工改造的单链抗体片段(scFv)那样容易相互沾粘，甚至聚集成聚体。更重要的是单独克隆并表达出来的VHH结构具有与原重链抗体相当的结构稳定性以及与抗原的结合活性，是目前已知的可结合目标抗原的较小单位，其分子量只有15KD，也因此被称作纳米抗体。

标准抗体、重链抗体和VHH纳米抗体

纳米抗体的应用：

纳米抗体的应用优势可用于生物医药研发（基因工程药物研发、ADC药物研发）；
用于临床体外诊断（胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法）；
用于肿瘤研究、免疫学研究等基础研究；申请具有自主知识产权的发明专利及科研奖项；拓展研究思路、发表国际知名学术刊物。
鉴于其独特的性质，VHH抗体（纳米抗体）作为免疫工具越来越受欢迎。Jackson ImmunoResearch开发了xi相关试剂，以促进在多种平台上识别VHH抗体，包括WesternBlotting、Elisa、流式细胞术和免疫荧光。

美国Jackson ImmunoResearch Inc.是二抗生产商，成立于1982年，专业致力于亲和纯化的二抗和纯化的免疫球蛋白的生产及偶联，30余年的专注，30余年的发展，Jackson的二抗以种类丰富（物种齐全，标记多样，应用广泛）、性价比高、供货迅捷而深受国际科研学者和工业客户的青睐。顺应科技发展Jackson ImmunoResearch Inc.研究开发出一系列二抗应用于骆驼免疫球蛋白，可用于检测、分析、加快VHH的发展研究，并提供羊驼二抗。欢迎来电咨询：400-021-8158！

西宝生物科技（上海）股份有限公司为Jackson ImmunoResearch品牌在华授权代理商，渠道正规，并备有大量现货。若您对Jackson ImmunoResearch产品感兴趣，请致电 400-021-8158了解详情。

纳米抗体相对于传统抗体具有众多优势：

纳米抗体诸多方面均优于传统抗体，基于羊驼重链抗体的VHH单域抗体的特殊结构，兼具了传统抗体与小分子药物的优势，几乎完美克服了传统抗体的开发周期长，稳定性较低，保存条件苛刻等缺陷，逐渐成为新一代治疗性生物医药与临床诊断试剂中的新兴力量。相比于常规抗体，纳米抗体的优势有：

分子量小，可穿透血脑屏障；VHH抗体可以穿过血脑屏障，进入其他偏远的地方，使它们在药物传递中发挥作用。良好的稳定性允许通过多种途径吸收，包括静脉和皮下注射、鼻吸入和口服。
原核或真核系统中高表达；VHH抗体易于克隆和修饰，它们可以在细菌、酵母和哺乳动物的表达系统中以高水平重组产生。
特异性强，亲和力高；纳米抗体较长的CDR3，可形成一稳定的暴露的凸环结构（凸环中具有稳定结构的二硫键），能够深入抗原内部以更好的结合抗原从而提高了其抗原特异性和亲和力。纳米抗体较长的CDR3，可形成一稳定的暴露的凸环结构（凸环中具有稳定结构的二硫键），能够深入抗原内部以更好的结合抗原从而提高了其抗原特异性和亲和力。
对人的免疫原性弱；
耐热性/稳定性好； VHH抗体具有良好的溶解性，对热、蛋白酶和pH值极端稳定

Jackson旗下开发的VHH结构域抗体是通过从羊驼血清中高度纯化的羊驼VHH片段来免疫山羊获得的。我们已经证明这些抗体对羊驼和美洲驼都有很强的识别能力。

实验案列：

	图1：Ki-67和Tubulin对HEP-2细胞的双重标记。 HEP-2细胞采用以下组合染色：羊驼抗兔ki-67（多克隆）VHH区域抗体和alexa fluor®488结合山羊抗羊驼免疫球蛋白G vhh结构域（128-545-230）（绿色）；小鼠抗Tubulin与RRX结合。山羊抗鼠免疫球蛋白G（115-295-146）（红色）。用DAPI（蓝色）进行核染色。
	图2：用ELISA法检测羊驼或骆驼的VHH抗体。每个rVHH按照10μg/ml涂于elisa板上，用HRP标记抗羊驼VHH抗体（128-035-230或128-035-232）和TMB底物检测。

流式检测案列：

山羊抗羊驼VHH抗体（例如Alexa Fluor®488共轭128-545-230）可用于检测患者细胞上的VHH，而不识别内源性免疫球蛋白G或来自小鼠、兔或大鼠的主要抗体。目前的肿瘤学研究在许多T细胞定向策略中采用了纳米体（VHH）技术来使用（先天性）免疫防御。这包括产生用于招募和激活细胞毒性或γδT细胞的双特异性格式，纳米源嵌合抗原受体（CAR）T细胞，以及开发阻断纳米抗体的免疫检查点（chanier和chames，2019）。修饰性T细胞的特征通常是通过流式细胞术来完成的，这样就可以对表达CAR的细胞进行分类和扩增。

我们使用多克隆羊驼VHH抗人免疫球蛋白G（而不是CAR）来证明128-545-230在流式细胞术中的应用。下面的实验代表淋巴细胞上的门控样本。山羊抗羊驼VHH不识别小鼠抗cd19，只有当VHH抗人免疫球蛋白G存在时才能检测到人免疫球蛋白G。


Panel A: 控样, 不含VHH 抗人免疫球蛋白G 一抗。细胞仅和小鼠抗-CD19 (APC-H7) 和Alexa Fluor® 488 山羊抗羊驼VHH抗体(128-545-230) 一起培养。 128-545-230 不能区分人免疫球蛋白G或小鼠一抗。	Panel B: 控样, 不含小鼠抗-CD19。细胞仅和VHH 抗人免疫球蛋白G一抗和Alexa Fluor® 488山羊抗羊驼VHH抗体一起培养。检出淋巴细胞表观免疫球蛋白G	Panel C: 双标细胞。细胞和小鼠抗-CD19 (APC-H7), VHH 抗人免疫球蛋白G一抗, 和Alexa Fluor® 488 山羊抗羊驼VHH抗体(128-545-230) 一起培养。在右上方显示存在淋巴细胞，对人免疫球蛋白G和CD19皆显阳性。

常用的羊驼和VHH二抗产品列表

标记物	☆山羊抗羊驼免疫球蛋白G (H+L)	☆山羊抗羊驼免疫球蛋白G (H+L)(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)	☆山羊抗羊驼免疫球蛋白G, 子类 2+3 特异性(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)	山羊抗羊驼免疫球蛋白G, VHH(min X 牛血清蛋白)	山羊抗羊驼免疫球蛋白G, VHH抗体(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)
未标记	1.0 mg 128-005-003	1.0 mg 128-005-160	0.5 mg 128-005-229	0.25 mg 128-005-232	0.25 mg 128-005-230
辣根过氧化物酶	1.0 ml 128-035-003	0.5 ml 128-035-160	0.25 ml 128-035-229	0.25 ml 128-035-232	0.25 ml 128-035-230
碱性磷酸酶	1.0 ml 128-055-003	0.5 ml 128-055-160	0.25 ml 128-055-229	0.25 ml 128-055-232	0.25 ml 128-055-230
生物素	1.0 ml 128-065-003	0.5 ml 128-065-160	0.25 ml 128-065-229	0.25 ml 128-065-232	0.25 ml 128-065-230
DyLight™ 405	1.0 mg 128-476-003	0.5 mg 128-475-160	0.25 mg 128-475-229	0.25 mg 128-475-232	0.25 mg 128-475-230
Alexa Fluor® 488	1.0 mg 128-545-003	0.5 mg 128-545-160	0.25 mg 128-545-229	0.25 mg 128-545-232	0.25 mg 128-545-230
Fluorescein (FITC)	1.0 mg 128-095-003	0.5 mg 128-095-160	0.25 mg 128-095-229	0.25 mg 128-095-232	0.25 mg 128-095-230
Cy™ 3	1.0 mg 128-165-003	0.5 mg 128-165-160	0.25 mg 128-165-229	0.25 mg 128-165-232	0.25 mg 128-165-230
Rhodamine (TRITC)		0.5 ml 128-115-160	0.25 ml 128-115-229	0.25 ml 128-115-232	0.25 ml 128-115-230
Rhodamine Red-X™	1.0 mg 128-295-003	0.5 mg 128-295-160	0.25 mg 128-295-229	0.25 mg 128-295-232	0.25 mg 128-295-230
Alexa Fluor® 594	1.0 mg 128-585-003	0.5 mg 128-585-160	0.25 mg 128-585-229	0.25 mg 128-585-232	0.25 mg 128-585-230
Alexa Fluor® 647	1.0 mg 128-605-003	0.5 mg 128-605-160	0.25 mg 128-605-229	0.25 mg 128-605-232	0.25 mg 128-605-230
Cy™ 5		0.5 mg 128-175-160	0.25 mg 128-175-229	0.25 mg 128-175-232	0.25 mg 128-175-230

备注：☆这些抗体主要与Fc区反应，不建议用于检测VHH抗体（纳米抗体）

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