RNA切割用重组CRISPR-Cas13a蛋白

来源：作者：人气：-发表时间：2020-02-03 21:41:00【大中小】

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Cas13a是VI型CRISPR-Cas系统效应蛋白，具有RNA介导的RNA酶切活性，是目前第二大类CRISPR-Cas系统发现能够降解RNA的蛋白。Cas9，Cpf1，C2c1均是由RNA介导的DNA核酸内切酶，对开发研究RNA工具，扩展CRISPR系统在基因编辑方面的运用具有重大价值。

古菌和细菌，利用CRISPR-Cas系统抵御外源DNA浸染的Cas蛋白有多种，它们都是由向导RNA介导的切割目标DNA的DNA核酸内切酶，如Cas9, Cpf1, C2c1等。Cas9和Cpf1已成功开发为重要的基因编辑工具，它们可作为开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶标的巧妙工具。

此前，基因编辑工具CRISPR-Cas9可以纠正个体细胞内的缺陷，预测可以治愈或预防多种人类疾病。但Cas9系统改变的是DNA，而不是RNA。专业人士认为CRISPR平台事实上也可以用来修改RNA。CRISPR开始被发现在细菌中可将一段遗传密码换成另一段遗传密码，所以被称为“分子剪刀。在CRISPR-Cas9系统中，Cas9是切割DNA的酶。

针对RNA的编辑工具也可以帮助科学家们修改基因的活性，同时不会对基因本身造成长久性改变。为研究RNA转录和RNA与基因位点的关系，CRISPR-dCas13系统与CRISPR-dCas9系统实现了对基因转录的RNA和基因位点的同时标记，提供了一个简单和便利的新手段。针对2019新型冠状病毒（2019-nCoV）研究应用时应注意，由于肺炎病毒RNA含量低，需要进行扩增插入探针，与13a反应被切割后检测出来。

西宝生物现货提供的CRISPR-Cas13a由含有Cas13a基因的大肠杆菌经发酵，然后通过分离方法之后，经过纯化后再冻干制成。

CRISPR-Cas13a

纯度>95% (SEC-HPLC/SDS-PAGE)

规格参数：100ug/1mg

使用说明：

将冻干 Cas13a纯水溶解，浓度>100μg/ml，稀释至工作浓度。避免反复冻融。

复溶后4℃可稳定储存7-10天；短期保存请分装后存放于-20℃。

产品特点：

含有Cas13a基因的E.coli经发酵分离和高度纯化后冻干

产品用途：

体外RNA切割；体外RNA检测；活细胞RNA的调控、RNA基因编辑；光学探针生物学标记。

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名称	英文名称	规格	分子量或比活	纯度
CRISPR-Cas9	Recombinant CRISPR-Cas9	100/500pmol	175KD	>95%
CRISPR-Cas12a	Recombinant CRISPR-Cas12a	100/2000pmol	140KD	>95%
CRISPR-Cas13a	Recombinant CRISPR-Cas13a	100/500pmol	140KD	>95%
SUMO蛋白酶	Recombinant SUMO Protease	1000U	20000U/mg	>95%
TEV蛋白酶	Recombinant TEV Protease	1000/10000U	1000U/mg	>99%

根据Cas蛋白的分类和效应复合物的性质主要分为两大类Class 1和Class 2，六种不同类型。

1类系统包括类型I、III、IV，效应复合物由多个Cas蛋白（具有一个或多个内切酶活性组分）组成并与crRNA紧密结合，

2类系统包括类型II、V和VI，只有一个具有内切酶活性的多结构蛋白。

II类CRISPR-Cas系统CRISPR/Cas9系统已用于基因敲除和敲入以及基因组标记等，方便基因操作和基因组研究。

而VI类系统又叫CRISPR-Cas13系统，是向导RNA介导的RNA靶向的内切酶系统，从15年被发现至今一共鉴定出四个亚型：VI-A(Cas13a/C2c2)， VI-B(Cas13b)， VI-C(Cas13c)和VI-D(Cas13d)。已经开始运用于RNA的敲低，RNA定点编辑，RNA检测以及RNA剪接调控。

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