生物制药残留DNA提取试剂盒（碘化钠法 292-81101）

来源：作者：人气：-发表时间：2023-09-12 00:00:00【大中小】

包含疫苗在内的大部分生物药都是使用培养细胞或大肠杆菌生产的，有研究者指出，通过这种方式生产的原料药、制剂可能会残留着宿主细胞来源的DNA。不可否认，宿主细胞或病毒来源的致癌基因很可能会通过这些残留DNA转运过来，或引起病毒DNA感染事件。因此，残留DNA的定量检测是生物制药和其工艺验证中不可或缺的一部分。

有报告建议生物药中每剂量残留DNA的含量不超过100 pg，不仅是欧美地区，其他国家也愈发认为必须将定量检测宿主细胞来源的残留DNA作为质量检测项目之一。而检测这种痕量残留DNA，则需要从样品中以高回收率提取痕量残留DNA。

生物制药残留DNA提取试剂盒（碘化钠法）

残留DNA提取试剂盒遵照中国药典记载的碘化钠法，适用于疫苗和治疗用生物制品所含宿主细胞残余DNA的提取。

残留DNA提取试剂盒可以提取样品中含有的极微量的DNA，回收率较高。DNA的提取操作时间为60-90 分钟。提取的DNA可以通过qPCR进行定量。西宝生物科技（上海）股份有限公司是Wako的授权一级代理，如您对产品感兴趣，咨询订购热线：400-021-8158

◆ 原理

1. 试剂盒中包含碘化钠和表面活性剂N-月桂基肌氨酸钠。碘化钠作为蛋白质增溶剂，与表面活性剂一同将样品中以蛋白质为主的成分转变为可溶状态。

2. 通过加入异丙醇，能够选择性地令核酸（主要是DNA）和糖原产生沉淀（即共沉淀）。

本试剂盒实现了在不使用固相载体或有机溶剂的情况下，通过简便的提纯步骤获得了沉淀物，以高回收率提取痕量DNA。

◆ 特点

●　遵照中国药典登载的碘化钠法^*
●　高回收率
●　单管操作（无需换管），耗时仅60-90 min
●　不需要苯酚和氯仿等有机溶剂
●　兼容多种DNA

* 为使DNA检测方法与国际标准保持同步，中国药典（The Chinese Pharmacopoeia）宣布建立残留细胞DNA检测国家标准。碘化钠法将作为残留DNA提取方法，被新增至2020版的中国药典中。

◆ 试剂盒构成

产品编号	内容物	内容量
299-81111	碘化钠溶液, CP	26 mL
296-81121	N-月桂酰肌氨酸钠溶液, CP	1.2 mL
293-81131	洗净液A, CP	42 mL
290-81141	洗净液B, CP	40 mL×2
297-81151	糖原溶液, CP	0.1 mL

备注：每种成分不单独出售

◆ 使用方法

过程1

过程2

◆ 应用案例

DNA spiking test（加标回收实验）

gDNA	E.Coli
Spike (fg)	Detection (fg)	Recovery (%)
1,000	939	94
10,000	11,004	110
100,000	100,009	100
1,000,000	969,911	97

gDNA	CHO
Spike (fg)	Detection (fg)	Recovery (%)
100	100	100
1,000	979	98
10,000	10,831	108
100,000	90,031	90
1,000,000	1,045,186	105

gDNA	Pichia pastoris GS115
Spike (fg)	Detection (fg)	Recovery (%)
10,000	10,316	103
100,000	94,045	94
1,000,000	1,031,630	103

DNA Extractor™ Kit(292-81101)可以高产量提取残留DNA，甚至少量残留DNA。

◆ 产品信息

产品编号	产品名称	包装
292-81101	DNA Extractor™ Kit for Residual DNA, CP Method(Sodium Iodide Method) 残留DNA提取试剂盒（碘化钠法）	50 tests

◆ 配套qPCR试剂

根据2020版《中国药典》“外源性DNA残留检测第三法（qPCR）”，可选用以下试剂进行下游定量

产品编号	产品名称	包装
317-08821	GeneAce Probe qPCR Mix II	50 reactions
313-08823	GeneAce Probe qPCR Mix II	200 reactions

含化学修饰的热启动酶及参比染料，适用于Taqman探针法。

◆ Seebio 品牌

含化学修饰的热启动酶及参比染料，适用于Taqman探针法。

产品编号	产品名称	包装
DAA1098A-1ml	Seebio® 热启动Taq酶探针法qPCR预混液(2X)	2×500uL

◆ 其它相关宿主残留检测试剂盒

产品编号	产品名称	包装
ADI-900-057	Protein A ELISA kit 蛋白A ELISA试剂盒	96 wells
ENZ-KIT127-0001	E. coli host cell protein ELISA kit	96 wells
ENZ-KIT128-0001	CHO host cell protein ELISA kit CHO宿主细胞蛋白ELISA试剂盒	96 wells
ENZ-KIT162-0001	HEK293T宿主细胞蛋白ELISA试剂盒	96 wells