让IPSCs也疯狂的鸡尾酒CEPT Cocktail

来源：作者：人气：-发表时间：2023-09-19 15:39:00【大中小】

CEPT是美国国立卫生研究院（NIH）开发的小分子混合物。由4种成分组成，并取其组成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的开头字母命名为“CEPT”。

研究表明，CEPT可防止人ES/iPS细胞（人多能干细胞；hPSCs）在细胞传代中的细胞应激和DNA损伤。与强效ROCK抑制剂Y-27632相似，可提高细胞传代和冻存时hPSCs的存活率。

此外，与基于hPSCs的胚状体和类器官形成、单细胞克隆和基因编辑等干细胞研究中所用的现有培养方法相比，CEPT还可改善细胞存活率。

FUJIFILMWako已上线经无菌测试且无需制备的即用型CEPT Cocktail溶液。本产品为经过滤器灭菌的溶液，可直接添加至培养基使用。有助于再生医疗研究。

◆ 特点

◆ 测试项目

◆ 使用方法

以1/1,000的量添加本品至培养基，充分混合后使用。

※使用注意

（沉淀于37°C下静置1~2 h可能会溶解，请避免反复冷冻和加热。）

◆ 适用范围

样品：人ES/iPS细胞
应用：

◆ 性能数据

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培养基，在37°C，5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm2）。

培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2-3天更换培养基，继续培养。

培养第8天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数细胞集落。

单细胞克隆测试

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培养基，在37°C，5% CO2的条件下培养人iPS细胞201B7株（96孔板）。

培养经过16 h以后，更换不含CEPT或Y-27632的培养基，每2~3天更换培养基，继续培养。

培养第13天时，确认细胞后，使用4%多聚甲醛固定细胞，ALP染色后，计数形成细胞集落的孔数与空孔数。

通过所有孔数与细胞集落形成孔数之比，计算细胞集落形成率。

【结果】

细胞接种数少时，添加CEPT的组比添加Y-27632的组形成的细胞集落更多。

未分化人iPS细胞的维持确认

【细胞株】人iPS细胞201B7株

【培养基】StemSure®hPSC培养基Δ+35ng/mL bFGF

Red: rBC2LCN-635（人iPS细胞膜染色）

Blue:DAPI (细胞核染色)

※BC2LCN是一种对存在与人ES/iPS细胞的膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素

添加CEPT时

添加Y-27632时

【结果】

添加CEPT时与添加Y-27632时都未观察到细胞形态的差异，均可确认未分化维持状态。

◆ 产品列表

产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
033-26071	CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物（1,000×）	细胞培养用	300 μL

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产品编号	产品名称	产品等级	产品规格
197-17571	StemSure®hPSC Medium Δ StemSure®人多能干细胞培养基	细胞培养用	100 mL
193-17573	StemSure®hPSC Medium Δ StemSure®人多能干细胞培养基	细胞培养用	100 mL×4
062-06661	bFGF Solution, MF 成纤维细胞生长因子溶液（碱性）	细胞培养用	50 μL
068-06663	bFGF Solution, MF 成纤维细胞生长因子溶液（碱性）	细胞培养用	50 μL×4
195-16031	StemSure®Freezing Medium StemSure®细胞冻存液	细胞培养用	100 mL
192-19081	StemSure®hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) StemSure®hPSC未分化干细胞清除剂	细胞培养用	100 μL
035-24593	CultureSure®10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure®10mmol/l Y-27632 溶液，无动物源	细胞培养用	1 mL
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259-00613	Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂	细胞培养用	5 mg
257-00614	Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂	细胞培养用	25 mg
030-24021	CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（选择性ROCK抑制剂）	细胞培养用	1 mg
036-24023			5 mg
034-24024			25 mg
030-24026			100 mg